關節(jié)炎模型誘導用膠原（Collagen）產(chǎn)品專題
（Collagen Induced Arthritis(CIA)膠原誘導的關節(jié)炎）
文章關鍵詞：
Arthritis 關節(jié)炎；Incomplete Freund's Adjuvant (IFA) 弗氏不*佐劑；Complete Freund's Adjuvant (CFA) 弗氏*佐劑；Type II Collagen II型膠原；Chondrex Inc.;
背景描述：
【膠原Collagen】Chondrex Inc.提供各種物種和類型的高度純化的II型膠原、IX型和XI型軟骨膠原，用于建立CIA（膠原誘導的關節(jié)炎）模型。CIA可通過II型膠原在嚙齒類動物和非人靈長類動物中誘導而成，但有文獻報道，XI型膠原也能誘導小鼠和大鼠的關節(jié)炎模型，因為XI型膠原的α3（XI）鏈與II型膠原的α1（II）鏈一致。另外，IX型膠原的自發(fā)性抗體也有助于小鼠多軟骨炎發(fā)病?？蒲腥藛T需根據(jù)自身實驗目的選擇合適的膠原物種和類型。
【佐劑Adjuvant】膠原誘導的關節(jié)炎（CIA）能在某些小鼠、大鼠和非人哺乳動物品系中成功誘導，通過將II型膠原與佐劑混合免疫的方法。為了成功誘導動物CIA，用來乳化膠原的佐劑類型至關重要。Chondrex Inc.提供不*佐劑和含各種濃度滅活結核分枝桿菌的*佐劑從而能用于優(yōu)化CIA免疫條件。
成功建模需考慮的幾大重要因素：
一、供體動物（Animal Vendors）
二、飼養(yǎng)條件（Housing Conditions）
三、動物年齡和品系（Animal Age&Strains）
A）小鼠（Mouse）
【年齡Age】：選擇至少7-8周齡，具成熟免疫系統(tǒng)的小鼠。老化的小鼠可能呈低發(fā)病率和低惡化程度。
【品系Strains】：膠原誘導關節(jié)炎（CIA）模型的敏感程度與MHC-class II分子有關，其對免疫用II型膠原產(chǎn)生反應。詳見【表1.建立CIA模型的常用大鼠和小鼠品種】。
DBA/1 (H-2q)和B10.RIII (H-2r)小鼠對CIA敏感型很高，DBA/1小鼠對雞，牛和豬來源的II型膠原有反應，B10.RIII對牛和豬來源的II型膠原有反應，但是對雞II型膠原反應很弱。
DBA/1 (H-2q)和B10.RIII (H-2r)小鼠對小鼠II型膠原反應很弱。即使用大量的小鼠II型膠原來免疫，CIA發(fā)病率仍非常低，約10%。
另外，一些CIA耐性小鼠品種能夠用來產(chǎn)生致關節(jié)炎抗體，說明CIA不僅是受限制于MHC類型。比如，IFN-γ或IL-10敲除的CIA抗性品種C57BL/6，129/Sv (H-2b)和Balb/c (H-2d)小鼠能夠產(chǎn)生致關節(jié)炎自抗體和關節(jié)炎，這表明關節(jié)炎的敏感性也受細胞因子的高度調控。
B）大鼠（Rat）
【年齡Age】：選擇至少7-8周齡，具成熟免疫系統(tǒng)的大鼠。
【品系Strains】：高敏感大鼠品系（Sprague-Dawley (SD)(RT1f), Wistar (RT1u)(1), BioBreeding/Diabetes-resistant (BB/DR)(RT1u) (9), Wistar Furth (RT1u), Louvain (LOU) (RT1u), Osborne-Mendal (OM) (RT1u), and Lewis (LEW) (RT1l) rats）；
BB大鼠是用來建立CIA的品種。Dark Agouti (DA)大鼠對CIA高度敏感，但對油誘導的關節(jié)炎模型（礦物油：IFA，單獨）低敏感。因此，DA大鼠的CIA模型可能同時表現(xiàn)出兩種不同病理機制。因此，DA大鼠不建議用來建立CIA模型。
表1. 建立CIA模型的常用大小鼠品種（Mouse and Rat strains commonly used for CIA） | |||||
Mouse Strain | H-2 Type | CIA Susceptibility | Rat Strain | MHC RT1 haplotype | CIA Susceptibility |
DBA/1 | q | High | Sprague-Dawley (SD) | f | High |
B10.Q | q | High | Wistar | u | High |
B10.G | q | High | Lewis（Lew） | I | High |
NFR/N | q | High | BioBreeding (BB)/Diabetes- resistant (DR) | u | High |
SWR | q | Resistant | Wistar Furth | u | High |
B10.RIII | r | High | Louvain | u | High |
B10 | b | Low | Osborne-Mendal (OM) | u | High |
C57BL/6 | b | Low | Dark Agouti (DA) | av1 | High |
C57BL/6 beige | b | Resistant |
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C57BL/6 x 129/Sv | b | Low |
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129/Sv | b | Resistant |
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B10.D2/nSn | d | Resistant |
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B10.D2/oSn | d | Resistant |
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Balb/c nu/nu | d | Resistant |
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C3H/He | k | Low |
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B10.S | s | Resistant |
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SJL/1 | s | Moderate |
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C.B-17 scid/scid |
| Resistant |
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四、佐劑（Adjuvant）
A）小鼠（Mouse）
弗氏*佐劑（CFA）包含高質量的結核分枝桿菌，對誘導嚴重的小鼠關節(jié)炎是必要的，因其能誘導強烈的免疫反應。不同于大鼠，將II型膠原和不*佐劑（IFA）乳化在一起不會產(chǎn)生關節(jié)炎。
強烈的抗體反應和正確的抗體亞型對誘導小鼠關節(jié)炎很重要?？贵w產(chǎn)生取決于抗膠原IgG2a和IgG2b亞型水平，它們能活化補體，誘導關節(jié)炎的必要步驟。研究顯示，含5mg/ml結核分枝桿菌的CFA能成功誘導關節(jié)炎，呈高致病率（50-70%），即使是CIA耐性小鼠品種，比如C57BL/6，B10，129/Sv小鼠（H-2b）。
B）大鼠（Rat）
因大鼠通常對佐劑誘導的關節(jié)炎（AIA）很敏感，不*氟氏佐劑（IFA）可用于建模。
五、膠原（Collagen）
使用高純度的天然II型膠原。去糖基化和變性的膠原都會影響致關節(jié)炎性，微弱污染比如胃蛋白酶在T細胞刺激反應中可能會引起假陽性反應。
膠原產(chǎn)品訂購：美國Chondrex原裝，基本現(xiàn)貨提供，咨詢價格和貨期，及技術問題。
品牌 | 名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
Chondrex | Immunization Grade Bovine Type II Collagen 牛II型膠原 | 20021 | 10 mg, lyophilized |
Chondrex | Immunization Grade Bovine Type II Collagen 牛II型膠原 | 20022 | 2 mg/ml x 5 ml |
Chondrex | Immunization Grade Chick Type II Collagen 雞II型膠原 | 20011 | 10 mg, lyophilized |
Chondrex | Immunization Grade Chick Type II Collagen 雞II型膠原 | 20022 | 2 mg/ml x 5 ml |
Chondrex | Immunization Grade Porcine Type II Collagen 豬II型膠原 | 20031 | 10 mg, lyophilized |
Chondrex | Immunization Grade Porcine Type II Collagen 豬II型膠原 | 20032 | 2 mg/ml x 5 ml |
Chondrex | Immunization Grade Bovine Type IX Collagen 牛IX型膠原 | 1072 | 5 mg, lyophilized |
Chondrex | Immunization Grade Chick Type IX Collagen 雞IX型膠原 | 1071 | 5 mg, lyophilized |
Chondrex | Immunization Grade Porcine Type IX Collagen 豬IX型膠原 | 1073 | 5 mg, lyophilized |
Chondrex | Immunization Grade Bovine Type XI Collagen 牛XI型膠原 | 1082 | 5 mg, lyophilized |
Chondrex | Immunization Grade Chick Type XI Collagen 雞XI型膠原 | 1081 | 5 mg, lyophilized |
Chondrex | Immunization Grade Porcine Type XI Collagen 豬XI型膠原 | 1083 | 5 mg, lyophilized |
操作流程詳見說明書：
Mouse Collagen-Induced Arthritis Protocol
Rat Collagen-Induced Arthritis Protocol
佐劑產(chǎn)品訂購：美國Chondrex原裝，基本現(xiàn)貨提供，咨詢價格和貨期，及技術問題。
品牌 | 名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
Chondrex | Complete Freund's Adjuvant（CFA），1mg/ml 弗氏*佐劑 | 7008 | 5ml |
Chondrex | Complete Freund's Adjuvant（CFA），2mg/ml 弗氏*佐劑 | 7009 | 5ml |
Chondrex | Complete Freund's Adjuvant（CFA），3mg/ml 弗氏*佐劑 | 7015 | 5ml |
Chondrex | Complete Freund's Adjuvant（CFA），4mg/ml 弗氏*佐劑 | 7001 | 5ml |
Chondrex | Complete Freund's Adjuvant（CFA），5mg/ml 弗氏*佐劑 | 7023 | 5ml |
Chondrex | Incomplete Freund's Adjuvant（IFA）弗氏不*佐劑 | 7002 | 5ml |
— —Written/Edited by V. Shallan【版權歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學和生物技術領域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務工作，主要從事細胞生物學、植物學、分子生物學、免疫學、生物化學、蛋白組學。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領域。 本公司秉承“以人為本，以誠為信、合同守信”的經(jīng)營理念。堅持"品質保障"的原則為廣大客戶提供產(chǎn)品。