常用還原劑：TCEP-HCl 三-(2-甲酰乙基)膦鹽酸鹽

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Reducing agents 還原劑；DTT；DTE；TCEP-HCl；Cleland’s Reagent 克萊氏試劑；Antioxidant 抗氧化劑； CAS NO：51805-45-9； 

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【溫馨提示】：見我司整理的還原劑產(chǎn)品專題，了解目前常用幾種還原劑的特征，了解TCEP-HCl與DTT的性能一一比較，選擇的還原劑，讓你的實驗順心開展。

TECP-HCl 基本描述：

TCEP Hydrochloride（TECP-HCl），英文名Tris(2-carboxyethyl)phosphine hydrochloride，中文名三(2-羧乙基)膦鹽酸鹽，CAS：51805-45-9，一種不含硫醇且無臭的強還原劑，廣泛用作各種多肽和蛋白中的二硫鍵還原。水溶性強，在堿性和酸性溶液中都能穩(wěn)定保存。還可用作許多重金屬離子如Zn(II)、Cd(II)、 Pb(II)和Ni(II)的螯合劑。
 

TECP-HCl的優(yōu)勢（與BME,DTT相比較）：

與其他的還原劑如DTT，β-ME（BME）相比，TECP-HCl具有許多優(yōu)點：

1） 無臭：不像DTT或BME，無異味，可在工作臺上進行蛋白或多肽還原實驗，創(chuàng)造更健康的實驗環(huán)境；

2） 強特異性：寬廣pH范圍內(nèi)，選擇性的，*且均勻的還原zui穩(wěn)定的水溶性二硫鍵；

3） 使用簡便：于室溫，pH 5的條件下＜5min即可有效還原；

4） 穩(wěn)定性高：TECP-HCl自身結(jié)構(gòu)的內(nèi)在穩(wěn)定性和對空氣氧化的抵抗性，使得處理和保存的過程中不需做任何預防措施。與蛋白中的其他官能團不會發(fā)生反應。
5）  效率高：對于大部分應用，5-50mM TECP-HCl于室溫條件作用幾分鐘，即可提供充足的摩爾力來還原二硫鍵。

6）  兼容性廣：因不含硫醇，在執(zhí)行許多馬來酰亞胺標記或交聯(lián)試劑的反應前勿需提前去除TECP-HCl。大多數(shù)條件下，＜10-20mM TECP-HCl兼容于馬來酰亞胺化學反應。

使用TECP-HCl的考慮事項【何時用，何時不用？？】：

1） TCEP-HCl易溶于幾乎所有pH的水溶性緩沖液；這一特性允許實驗前開始準備工作液和10×儲存液。

2） TCEP-HCl在磷酸鹽緩沖液不是很穩(wěn)定，特別在中性或堿性pH。因此，若必須使用溶于PBS的TCEP，建議使用前才開始配制工作液。

3） TCEP-HCl可能用作DTT和BME的替代物，用于SDS-PAGE實驗用的樣品上樣緩沖液；使用終濃度為50mM。

4） 由于TCEP-HCl在溶液中帶正電荷，因此不能與等電點聚焦應用兼容。

基本特性：

1） CAS NO：51805-45-9
2） 英文同義名：TCEP-HCl; Tris (2-Carboxyethyl) phosphine Hydrochloride;

3） 中文同義名：三(2-羰基乙基)磷鹽酸鹽；三(2-羧乙基)膦鹽酸鹽；
4） 分子式：C₉H₁₅O₆P · HCl  
5） 分子量：286.65 g/mol
6） 外觀：白色晶體

7） 純度：≥99%8） 熔點：170-180℃9） 溶解性：溶于水（50mg/ml）

10） 化學結(jié)構(gòu)式：

 儲存液制備

1）  稱取5.73g TCEP-HCl（Mw：286.65 g/mol），加35ml分子生物學級別的冰水，使其充分溶解混勻，此時得到的溶液酸性強，pH約為2.5。

2）  用10N NaOH或10N KOH調(diào)整pH到7.0。
3）  用冰水定容至40ml，即得到0.5M TCEP儲存液。按1ml/管分裝后，置于-20°C凍存。

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注意事項

1）粉末保存過程中瓶口需密封，置于低溫避光處。儲存過程遠離氧化劑。

2）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

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TCEP-HCl（DTT升級還原劑）生物分子 

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