F-DH5a化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
簡要描述:
F-DH5a化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞:是大腸桿菌DH5a菌株經(jīng)特殊工藝制作所得的快速轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞,無需42℃熱激,37℃孵育步驟,只需冰浴,10min內(nèi)能完成轉(zhuǎn)化、涂板步驟。經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率可達1~5×108 cfu/μg DNA.
產(chǎn)品時間:2024-03-20
F-DH5a Chemically Competent Cell 大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
產(chǎn)品標(biāo)簽:
F-DH5a;F-*0;DH10B;JM109;EPI400;羧芐;卡那霉素;鏈霉素;
產(chǎn)品訂購:
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價格(元) |
MF2348-2000UL | F-DH5a Chemically Competent Cell 大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 | 20×100μl | 280 |
MF2348-10000UL | F-DH5a Chemically Competent Cell 大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 | 100×100μl | 1280 |
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產(chǎn)品組分:
組分編號 | 組分名稱 | 貨號(規(guī)格) | |
MF2348-2000UL | MF2348-10000UL | ||
MF2348-A | F-DH5a Competent Cell | 20×100μl | 100×100μl |
MF2348-B | Control Vector puC19, 10pg/μl | 10μl | 10μl |
菌株描述
DH5a菌株基因型:F-φ80 lac ZΔM15 Δ(lacZYA-arg F) U169 endA1 recA1 hsdR17(rk-,mk+) supE44λ- thi-1 gyrA96 relA1 phoA
產(chǎn)品描述
本品是大腸桿菌DH5a菌株經(jīng)特殊工藝制作所得的快速轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞,無需42℃熱激,37℃孵育步驟,只需冰浴,10min內(nèi)能完成轉(zhuǎn)化、涂板步驟。經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率可達1~5×108 cfu/μg DNA。且在-80℃能穩(wěn)定保存幾個月轉(zhuǎn)化效率不發(fā)生改變。
注意事項
5) 產(chǎn)品包裝內(nèi)含質(zhì)粒pUC19 DNA(10pg/μl),供對照實驗用。
6) 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
使用方法【所有操作均在無菌條件的標(biāo)準(zhǔn)下進行】
一、 快速轉(zhuǎn)化操作(10min)
1.1 提前15min將用到的篩選培養(yǎng)平板拿到37℃預(yù)熱。
1.2 取F-DH5a感受態(tài)細(xì)胞從-80℃取出,迅速插入冰中,5min后待菌塊融化,加入目的DNA(質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物),并用手彈打管底輕輕混勻,冰中靜置5min。
1.3 用移液槍將感受態(tài)細(xì)胞-DNA混合物轉(zhuǎn)移到37℃預(yù)熱的LB篩選培養(yǎng)平板上,用無菌的涂布棒將細(xì)胞均勻涂開,表面無水漬。
1.4 將平板倒置于37℃過夜培養(yǎng)。如果進行藍(lán)白斑篩選,至少培養(yǎng)15h。
【注意】:F-DH5a感受態(tài)細(xì)胞涂含氨芐或羧芐篩選培養(yǎng)平板時效率搞,若涂卡那霉素或其他抗生素平板,轉(zhuǎn)化效率會下降(由于沒有孵育步驟,卡那霉素等對菌體毒性較大)。若要提高卡那霉素或其他抗性質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化效率,按照快速熱激轉(zhuǎn)化操作。
二、 快速熱激轉(zhuǎn)化操作(25min,能提高轉(zhuǎn)化效率)
【注意】:當(dāng)質(zhì)粒>7kb,通過以下熱激轉(zhuǎn)化操作:取F-DH5a感受態(tài)細(xì)胞從-80℃取出,迅速插入冰中,5min后待菌塊融化,加入目的DNA(質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物),并用手管底輕輕混勻,冰中靜置20min。
42℃水浴熱激45s,迅速放回冰上并靜置2min。加入700μl 無菌的LB培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃ 搖床,200 rpm振蕩培養(yǎng)30min。之后涂板。
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貨號 | 名稱 | 規(guī)格 |
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MF2313-2000UL | JM109 Chemically Competent Cell大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 | 20×100μl |
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MF2348-2000UL | F-DH5a Chemically Competent Cell 大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 | 20×100μl |
MF2349-1000UL | *0F` Chemically Competent Cell 大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 | 10×100μl |
MF2350-1000UL | EPI400 Chemically Competent Cell 大腸桿菌化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞 | 10×100μl |
MS0021-10G | Chloramphenicol, USP Grade氯霉素 | 10g |
MS0018-10G | Ampicillin, Sodium Salt氨芐青霉素鈉 | 10g |
MS0017-5G | Carbenicillin, Disodium Salt羧芐青霉素二鈉鹽 | 5g |
MS0019-10G | Kanamycin Sulfate硫酸卡那霉素 | 10g |
MS0014-1G | Rifampicin, USP Grade利福平 | 1g |
— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實驗室消耗品與實驗服務(wù)工作,主要從事細(xì)胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承“以人為本,以誠為信、合同守信”的經(jīng)營理念。堅持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。
F-DH5a化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
F-DH5a化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞