Sulfidefluor 7 AM (SF7-AM) (H2S Probe)

硫化氫熒光探針

產(chǎn)品標簽

Sulfidefluor 7 AM (SF7-AM) ; 7-Azido-4-methylcoumarin (AzMC) ；7-氨基-4-甲基香豆su（AMC）；WSP-1 (Washington State Probe-1)；WSP-5；硫化氫（H2S）特異性探針；PAG (DL-propargylglicine)硫化氫合成抑制劑；Hypotaurine  H2S清除劑；CAS NO：1416872-50-8；

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品描述

Sulfidefluor 7 AM (SF7-AM)是一種用于硫化氫（H2S）檢測的細胞可捕獲的熒光探針。一旦進入胞內，乙酰甲酯基團被胞內酯酶水解生成一陰電荷，從而探針被捕獲停留在胞內。探針中的疊氮化物官能團與緩沖液或細胞中的H2S反應生成酰胺羅丹明110，激發(fā)和發(fā)射波長分別是498/526nm [1-2]。SF7-AM能用于監(jiān)測人臍靜脈內皮細胞（HUVECS）中VEGF誘導產(chǎn)生的H2S [2-3]。

產(chǎn)品特性

1） CAS NO：1416872-50-8

2） 化學名：N-[2-[(Acetyloxy)methoxy]-2-oxoethyl]-N-[(3',6'-diazido-3-oxospiro[isobenzofuran-1(3H),9'- [9H]xanthen]-5-yl)carbonyl]glycine (acetyloxy)methyl ester

3） 同義名：Sulfidefluor-7 acetoxymethyl ester; SF7 AM;

4） 分子式：C31H23N7O12

5） 分子量：685.6

6） 外觀：白色固體

7） 純度：≥95%

8） Ex/Em：498/526nm

9） 溶解性：溶于DMSO（5mg/ml）、DMF（10mg/ml）

10） 化學結構式：

保存與運輸方法

保存：-20oC避光干燥保存，至少2年有效。 

運輸：冰袋運輸。

使用方法

1、 儲存液制備

將低溫保存的產(chǎn)品從冰箱取出，置于室溫回溫至少20min。低速離心3-5min。之后往瓶內加入適量無水DMSO充分溶解配成適宜濃度的儲存液（比如，1mg SF7-AM（Mw: 685.6）加入291μl DMSO充分溶解后即得到5mM儲存液）。按照單次用量分裝，≤-20℃避光凍存，避免反復凍融，建議1個月使用。

2、 工作濃度

正式實驗前，取上述配制的儲存液用適當緩沖液或培養(yǎng)基稀釋到所需工作濃度即可。具體的工作濃度請參考文獻或根據(jù)自身實驗需求來進行優(yōu)化調整。參考下方一些實驗數(shù)據(jù)，來自公開文獻，僅作參考。

應用示例1：使用SF7-AM來測定VEGF刺激HUVECs產(chǎn)生的內源性H2S。HUVECs加入2.5µM SF7-AM于37℃，5% CO2孵育30min。之后更換不含探針的培養(yǎng)基，細胞成像。對于VEGF刺激，取2µl VEGF（10µg/ml）加入孔內使其終濃度為40ng/ml。細胞再于37℃，5% CO2孵育30min。相同的區(qū)域再進行細胞成像。共聚焦成像用488nm氬離子激發(fā)器激發(fā)，用META檢測器收集500-650nm之間的發(fā)射熒光信號?！疚墨I來源：Chao, C., Zatarain, J.R., Ding, Y. et al. Cystathionine-β-Synthase Inhibition for Colon Cancer: Enhancement of the Efficacy of Aminooxyacetic Acid via the Prodrug Approach. Mol Med 22, 361–379 (2016). 】

應用示例2：使用SF7-AM來測定OA-CysTCM-1的H2S釋放能力。bEnd.3細胞鋪在多聚D-賴氨酸包被的培養(yǎng)板上。長滿的細胞用PBS清洗后，用SF7-AM（5 µM）孵育30min。之后用PBS清洗，孵育在含OA-CysTCM-1 (100 µM)和半胱av酸（250 µM）或只含半胱av酸（250 µM）的溶液30min。成像前，細胞用PBS清洗后，加入2ml PBS。用帶標準GFP濾片的熒光顯微鏡成像?！疚墨I來源：Zhao Y, Steiger AK, Pluth MD. Cysteine-activated hydrogen sulfide (H₂S) delivery through caged carbonyl sulfide (COS) donor motifs. Chemical Communications (Cambridge, England). 2018 May;54(39):4951-4954. DOI: 10.1039/c8cc02428f. PMID: 29701221; PMCID: PMC5965689.】

Figure. H2S Release from OA-CysTCM-1 in bEnd.3 cells.Top: DIC (left) and GFP (right) channels with cysteine (250 μM) and SF7-AM (5 μM). Bottom: DIC (left) and GFP (right) channels with cysteine (250 μM), OA-CysTCM-1 (100 μM), and SF7-AM (5 μM). Scale bar represents 100 μM.

注意事項

1） 整個染色過程中需注意避光。

2） 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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參考文獻

[1] Lippert AR, New EJ, Chang CJ. Reaction-based fluorescent probes for selective imaging of hydrogen sulfide in living cells. J Am Chem Soc. 2011 Jul 6;133(26):10078-80. doi: 10.1021/ja203661j. Epub 2011 Jun 15. PMID: 21671682.

[2] Lin VS, Lippert AR, Chang CJ. Cell-trappable fluorescent probes for endogenous hydrogen sulfide signaling and imaging H2O2-dependent H2S production. Proc Natl Acad Sci U S A. 2013 Apr 30;110(18):7131-5. doi: 10.1073/pnas.1302193110. Epub 2013 Apr 15. PMID: 23589874; PMCID: PMC3645565.

[3] Yuan S, Pardue S, Shen X, Alexander JS, Orr AW, Kevil CG. Hydrogen sulfide metabolism regulates endothelial solute barrier function. Redox Biol. 2016 Oct;9:157-166. doi: 10.1016/j.redox.2016.08.004. Epub 2016 Aug 11. PMID: 27552214; PMCID: PMC4993857.

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