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產(chǎn)品中心
凝膠染料  分子生物學(xué)

凝膠染料 分子生物學(xué)

簡(jiǎn)要描述:

凝膠染料 分子生物學(xué) ,SYBR Green II是目前已知電泳凝膠中RNA檢測(cè)較靈敏的染料之一,在瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠中低檢到100pg RNA或ssDNA的單一條帶(使用254nm紫外反射光源照射,并用寶麗來(lái)667黑白膠片和SYBR濾光片拍照)

產(chǎn)品時(shí)間:2024-03-20

SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DMSO)

RNA凝膠染料

 

 

產(chǎn)品標(biāo)簽

SYBR Green II;GoldView;Acridine Orange 吖啶橙;GelRed; GelGreen;溴化乙錠(EB);SYBR Green I;

 

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品編號(hào)

規(guī)格

價(jià)格(元)

SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DMSO) RNA凝膠染料

MF0752-100UL

100µl

780

SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DMSO) RNA凝膠染料

MF0752-500UL

500µl

2950

 

產(chǎn)品描述

SYBR Green II是目前已知電泳凝膠RNA檢測(cè)較靈敏的染料之一,在瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠中低檢到100pg RNA或ssDNA的單一條帶(使用254nm紫外反射光源照射,并用寶麗來(lái)667黑白膠片和SYBR濾光片拍照)。即使用300nm透射光也能檢測(cè)到500pg RNA的單一條帶。SYBR Green II的靈敏度明顯強(qiáng)于溴化乙啶(EB)。標(biāo)準(zhǔn)瓊脂糖迷你膠EB低檢出1.5ng單鏈核酸的單一條帶(使用300nm透射光照射并用橙-紅明膠濾光片拍照)。

SYBR Green II在變性瓊脂糖/甲醛凝膠和聚丙烯酰胺/尿素凝膠中的檢測(cè)靈敏度有點(diǎn)降低,然而仍優(yōu)于EB。為了獲得大的檢測(cè)靈敏度,瓊脂糖/甲醛凝膠必須在EB染色前清洗數(shù)小時(shí)。相反,不做任何的清洗或脫色步驟,用SYBR Green II染色的瓊脂糖/甲醛凝膠或聚丙烯酰胺/尿素凝膠能檢測(cè)到1ng RNA單一條帶(254nm反射照明)和4ng RNA單一條帶(300nm透射照明)。SYBR Green II在RNA檢測(cè)具備這一靈敏度的特性歸因于幾個(gè)因素,包括*的熒光量子產(chǎn)量、結(jié)合能力和熒光增強(qiáng)。

本品溶于DMSO 10,000×的SYBR Green II RNA核酸染料,可用于:1)Northern Blot、起始位點(diǎn)作圖或cDNA制備前對(duì)RNA產(chǎn)物的小量分析;2)高分辨率變性梯度凝膠電泳(DGGE)后對(duì)5rRNA遷移方式的觀察;3)單鏈構(gòu)象多態(tài)性(SSCP)中的DNA染色;4)PCR擴(kuò)增前對(duì)DNA染色。

 

注意事項(xiàng)

  • 必須警告用戶注意,目前尚無(wú)關(guān)于SYBR Green II 對(duì)人體的致突變性或毒性的數(shù)據(jù)。由于該染料與核酸結(jié)合,應(yīng)當(dāng)被看作潛在誘變劑,使用時(shí)要小心謹(jǐn)慎。在處理DMSO儲(chǔ)存液時(shí)應(yīng)特別小心,因DMSO能促進(jìn)有機(jī)分子進(jìn)入組織。強(qiáng)烈建議處理DMO儲(chǔ)存液需戴雙層手套。和所有的核酸染料一樣,含SYBR Green II RNA核酸染料的溶液需先穿過(guò)活性炭再丟棄?;钚蕴恐蟊仨毞贌齺?lái)破壞染料。
  • SYBR Green II可通過(guò)乙醇沉淀法從核酸中去除。異丙醇沉淀法去除效果稍差些。正丁醇萃取、氯萃防取和酚萃取法無(wú)法有效去除染料。
  • 先用EB染色的凝膠可接下來(lái)用SYBR Green II染色,根據(jù)電泳后染色(post-staining)的標(biāo)準(zhǔn)步驟操作。與直接用SYBR Green II染色相比較可能靈敏度有些降低。
  • 不要在玻璃器皿中稀釋SYBR Green II儲(chǔ)存液,因其會(huì)結(jié)合到玻璃上。在聚丙烯器皿中稀釋儲(chǔ)存液。
  • SYBR Green II不會(huì)干擾酶反應(yīng)。
  • 當(dāng)用SYBR Green II染Northern或Southern Blot凝膠,建議在預(yù)雜交液和雜交液內(nèi)加入0.1%-0.3% SDS。
  • 不建議用254nm紫外透射儀對(duì)凝膠拍照,因紫外光源的輪廓會(huì)出現(xiàn)在照片上。需要使用允許525nm光透過(guò)且排斥其他波長(zhǎng)光的濾光片。
  • 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
  • 光譜特征

SYBR Green II RNA核酸染料可用常見的紫外反射和透射激發(fā)光源,以及手持式紫外燈檢測(cè)。SYBR Green II大激發(fā)波長(zhǎng)為497nm,但還有一個(gè)二級(jí)激發(fā)峰集中在254nm附近。與RNA結(jié)合的SYBR Green II的熒光發(fā)射集中在520nm。這些光譜特性讓SYBR Green II適用于多種凝膠檢測(cè)儀,從紫外反射(上紫外)和透射儀(下紫外)到氬離子激光器和水銀燈激發(fā)的凝膠掃描儀。

 

使用方法

一、使用前準(zhǔn)備工作

使用前將本品取出并回溫至室溫,使DMSO*解凍、溶液均一。于離心機(jī)上短暫離心確保所有溶液管底。*次使用時(shí)可將本品分裝成多個(gè)小份后凍存,小份染料能更溶解

 

、 染色方法

1電泳后染色(后染,推薦)

2電泳前染色(預(yù)染)

 

、 觀察和凝膠成像

3.1 使用300nm紫外透射或254nm紫外反射光(靈敏度更高)照射染色凝膠。

3.2 為了加靈敏度,建議使用黑白膠片,可用的SYBR Green照相濾光片(Thermo fisher#S7569)拍照。許多其他的黃色或綠色明膠或玻璃紙濾光片也能用來(lái)拍照,但絕大多數(shù)可能會(huì)減低靈敏度。EB染色凝膠拍照用的橙-紅濾光片不適合于SYBR Green II染色凝膠。

3.3 用的SYBR Green照相濾光片(Thermo fisher#S-7569)和Polaroid 667黑白膠片對(duì)凝膠進(jìn)行拍照。染色凝膠基本無(wú)背景熒光,當(dāng)檢測(cè)少量RNA,允許長(zhǎng)期膠片曝光。對(duì)于300nm透射,通常F-stop設(shè)置4.5時(shí)曝光1-2s足夠。對(duì)于254nm反射(特別是手持燈),大約需要曝光1-1.5min以得到大靈敏度。

 

相關(guān)產(chǎn)品

貨號(hào)

名稱

規(guī)格

MF0751-100UL

SYBR Green I Nucleic Acid Gel Stain  (10,000× in DMSO)  核酸凝膠染料

100µl

MF0752-100UL

SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DMSO) RNA凝膠染料

100µl

MF0753-1ML

GoldView Nucleic Acid Gel Stain (10,000×) 核酸染料(10,000×)

1ml

MF0754-500UL

MKRed Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in Water) 核酸凝膠染料(效果同GelRed)

500µl

MF0755-500UL

MKGreen Nucleic Acid Gel Stain (10,000× in Water) 核酸凝膠染料(效果同GelGreen)

500µl

MF0756-1G

Ethidium Bromide (EB) 溴化乙錠(EB,粉末)

1g

 

 

 — —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

 

 

上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)室消耗品與實(shí)驗(yàn)服務(wù)工作,主要從事細(xì)胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承以人為本,以誠(chéng)為信、合同守信的經(jīng)營(yíng)理念。堅(jiān)持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。

 

SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DMSO) RNA凝膠染料 分子生物學(xué)

SYBR Green II RNA Gel Stain (10,000× in DMSO) RNA凝膠染料 分子生物學(xué)

 

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